使用磁硅珠的高效率基因组DNA抽提试剂盒。可以从全血中抽提。
高效率基因组DNA抽提试剂盒 MagExtractor™ -Genome-
用途
使用磁硅珠的高效率基因组DNA抽提试剂盒。可以从全血中抽提。
说明
本品是使用磁硅珠从血液、培养细胞和组织等抽提高纯度基因组DNA的试剂盒。
本试剂盒利用在蛋白质变性剂(离液盐)中，破碎溶液中的基因组DNA被磁硅珠吸附的原理来回收DNA，无需借助苯酚等有害试剂来进行除蛋白操作和乙醇沉淀・高速离心分离操作，就能简便地进行抽提。回收的基因组DNA可以直接用于PCR等酶反应中。
本试剂盒与磁珠分离台架一起使用，可以从全血直接分离DNA，所以无需进行白血球的分离步骤，非常方便。
特征
●可简便地在短时间内完成抽提
其基本原理是利用磁硅珠对基因组DNA的吸附性，能简便地在短时间内抽提基因组DNA。
●安全
无需使用苯酚/氯仿等有害溶剂。
●可得到高纯度的基因组DNA
抽提的基因组DNA可直接用于各种实验。
●适用于各种不同来源的样品
能从全血、动物培养细胞、动物组织及鼠尾等样品中直接抽提基因组DNA。
实验例
1.得率与纯度的探讨
使用本试剂盒和其他公司生产的试剂盒，从100μl全血中抽提基因组DNA。结果可知使用本试剂盒的得率大致与使用其他公司的试剂盒得率相等。另外，纯度方面，已确认用A公司和C公司的试剂盒结果中混有蛋白质及RNA等杂质，而使用本试剂盒没有发现杂质。通过使用本试剂盒，可以从全血等生物体样本中抽提出高纯度的基因组DNA。
2.抽提DNA的PCR示例
从10个无血缘关系的正常人身上采集100μl全血，用本试剂盒抽提基因组DNA。结果显示：可以抽提得到A260nm/280nm为1.83〜1.84的高纯度基因组DNA约1.4〜2.2μg。
基因组DNA抽提之后，取总量的1/20为模板，用Taq DNA Polymerase对单基因座位点VNTR部位的MCT118进行PCR分析。MCT118由16碱基的重复序列组成，通过对其重复次数的测定，可以用来进行个人识别。结果显示，可检测到每个人特异的扩增条带。
3.大鼠组织基因组DNA的抽提及PCR分析示例
取5mg -80℃冻结的切片置于本试剂盒的溶解・吸附液中进行匀浆后，离心取上清，使用本试剂盒进行基因组DNA的抽提。结果显示，分别可得到2.3μg和1.6μg的基因组DNA。260nm/280nm分别为1.86、1.83。另外，使用提取的DNA，用Taq DNA Polymerase扩增TNF-α基因(482bp, 1226bp)，结果显示，可以得到良好的结果。
参考文献
1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)
- 产品内容
溶解・吸附液
洗涤液
磁珠
*除试剂盒以外还需要准备以下的试剂。
灭菌水
EtOH
- 注意事项
Code No.MFX-192 的产品是自动核酸抽提装置 MFX-9600系列专用的，不能用于手动抽提法中。
- 基本反应条件
本试剂盒按以下步骤进行抽提高纯度的基因组DNA。
1) 向样品中添加含有离液盐的溶解・吸附液，裂解样品中的细胞。
2) 添加磁性硅珠，通过混合，使样品中的DNA被吸附在硅珠表面。
3) 使用2类洗涤液洗涤硅珠，除去不要的蛋白质、RNA和盐等。
4) 使用灭菌水或低盐浓度的buffer等，从硅珠上溶解出DNA，进行回收。
- 备注
MagExtractor<sup>TM</sup>系列的各试剂盒中含有的磁性硅珠，其组分各不相同，不能与其他试剂盒中的磁珠混用。
- 几点建议
●磁性硅珠的分离
手动使用本试剂盒时，配合使用磁珠分离专用台架Magical Trapper，操作简便。也可用简易台式离心机来代替磁珠分离专用台架以进行分离。
●在PCR中样品的使用量
回收的基因组DNA溶液中，含有少许乙醇。所以对PCR的样品来说，建议使用相当于反应液1/5以下的剂量。要蒸发掉乙醇，则可将回收液在75℃下加热5分钟。
●抽提时使用的样品量
样品量过多会导致得率下降。建议使用适度的样品量。
FAQ请点击这里。
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