使用磁硅珠的高效率质粒抽提试剂盒。
高效率Plasmid抽提试剂盒 MagExtractor™ -Plasmid-
用途
●质粒DNA抽提
说明
回收的基因组DNA可以直接用于PCR等酶反应中。
本试剂盒与磁珠分离台架一起使用，可以从全血直接分离DNA，所以无需进行白血球的分离步骤，非常方便。
本试剂盒是用来从大肠杆菌中抽提高纯度质粒DNA的试剂盒。抽提的质粒DNA可直接用于测序、各种酶反应及转化反应中。
本试剂盒利用磁硅珠能吸附匀浆溶液中质粒DNA的原理来回收质粒DNA，无需借助苯酚等有害试剂来进行除蛋白操作和乙醇沉淀操作。而且，能将使用高速离心机进行的离心操作次数减到最少 (使用自动核酸抽提装置「MFX® 系列」时，无需离心操作)。
本试剂盒，可与磁珠分离专用台架一起使用。
特征
●惊人的低成本
作为手动试剂盒，每处理一个样品的成本非常低。
●简便・短时间
其基本原理是利用磁硅珠对质粒DNA的吸附性，能简便地在短时间内抽提出质粒DNA。
●安全
不必使用苯酚/氯仿处理。
●可制备高纯度的质粒DNA
使用本试剂盒抽提的质粒DNA，几乎不含基因组DNA、RNA和蛋白质等杂质，可用于各种用途。
实验例
1. 用限制酶处理抽提后的质粒
2.抽提出的质粒的测序分析
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将0.5μg本试剂盒抽提出的pUC18，用ABI PRISM 310 Genetic Analyzer进行测序。测序引物采用M13 Primer P8，试剂盒采用dRhodamine Terminator Cycle Sequencing FS Ready Reaction Kit(PE Applied Biosystems)。
结果显示，用本试剂盒抽提出的质粒的纯度完全符合自动测序仪的要求。
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参考文献
1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)
- 产品内容
2次悬浊液
溶解液Ⅰ*
溶解液Ⅱ
中和液
吸附液
溶出液
磁珠Ⅰ
磁珠Ⅱ
5×Loading Dye
*溶解液Ⅰ中有时会出现析出物。请在室温～40℃下把析出物完全溶解后再进行使用。
※除试剂盒以外还需要准备以下的试剂。
灭菌水
EtOH
- 注意事项
Code No.MFX-192 的产品是自动核酸抽提装置 MFX-9600系列专用的，不能用于手动抽提法中。
- 基本反应条件
本试剂盒作为手动试剂盒使用时，根据以下步骤抽提高纯度的质粒DNA。
1) 用与碱SDS法相同的原理把菌体溶解中和。
2) 用离心分离方法溶解质粒DNA并回收上清。
3) 通过添加、混合磁硅珠和含有离液盐的溶解、吸附液来把样品中的质粒DNA吸附到硅胶表面。
4) 使用洗净液将磁珠洗净，除去蛋白质、盐等。
5) 使用灭菌水或者低盐浓度的缓冲液等从磁珠上溶出质粒DNA，进行回收。
备注
MagExtractorTM 系列的各试剂盒中含有的磁性硅珠，其组分各不相同，不能与其他试剂盒中的磁珠混用。
- 几点建议
●B/F(固/液)分离
手动使用本试剂盒时，若使用磁珠分离专用台架Magical Trapper会操作更简便。也可用简易台式离心机来代替磁珠分离专用台架以进行B/F分离。
●对抽提的质粒DNA进行电泳
使用自动核酸抽提装置「MFX系列」，用限制酶处理级的方法回收到的质粒DNA溶液里会含有若干的乙醇，琼脂糖凝胶电泳时，使用一般的Loading Dye不能使其沉淀到凝胶槽底。推荐使用本试剂盒附带的Loading Dye。
●抽提时使用的样品量
样品量过多会导致得率下降。建议使用适度的样品量。
FAQ请点击这里。
相关产品
●磁珠专用台架
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| Magical Trapper | MGS-101 | 1个 | RMB 1,000 | 室温 | - |
●MagExtractorTM 系列
| 品名 | Code No. | 包装 | 价格 | 保存温度 | 说明书下载 |
|---|---|---|---|---|---|
| MagExtractorTM -Genome- | NPK-101 | 100次份 | RMB 1,200 | 4℃ |
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| MagExtractorTM –Plant Genome- | NPK-501 | 100次份 | RMB 1,600 | 4℃、室温 |
|
| MagExtractorTM –RNA- | NPK-201F | 100次份 | RMB 2,600 | 4℃ |
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| MagExtractorTM –Viral RNA- | NPK-401F | 100次份 | RMB 1,600 | 4℃ |
|
| MagExtractorTM –PCR & Gel Clean up- | NPK-601 | 200次份 | RMB 1,200 | 室温 |
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